Equipo necesario para el cultivo in vitro.

El equipo necesario para el cultivo in vitro es muy caro. Nosotros en nuestro instituto Carrillo Salcedo vamos a intentar sustituir el equipo más caro por otro equipo más barato que ya exista en nuestro laboratorio o en nuestros hogares. EQUIPO NECESARIO: 1.- Autoclave:Es donde se "esteriliza" todo lo que vamos a utilizar: agua, algunos nutrientes, material, etc. No se pueden meter proteinas. Es como una olla a presión, pero de mayor tamaño, donde se controla la presión y la temperatura (hasta 120º). Nosotros utilizaremos una olla a presión de nuestra cocina. 2.-Cámara de flujo laminar:Es donde se realizan todas las manipulaciones con la planta. Es un habitáculo con un operario en un ambiente estéril. Se usan rayos ultravioletas para esterilizar el aire. Nosotros intentaremos esterilizar una parte del laboratorio, usar las batas, mascarillas de papel y guantes. Es de vital importancia que el medio, los frascos, los aparatos y las semillas se mantengan desinfectadas desde el principio del proceso de germinación. Limpiaremos la superficie de trabajo con lejía. En todo momento trabajaremos cerca del mechero de alcohol. 3.-Medio de cultivo: A nivel industrial suele utilizarse lo siguiente: 4,4g de sales minerales ( solución mineral de MURASHIGUE Y SKOOG)incluye también vitaminas, 20g de sacarosa, 7g de agar por un litro de agua destilada). Siempre con un pH de entre 5 a 6. Nosotros utilizaremos un medio de cultivo casero mucho más barato ( para un litro): 100g de plátano maduro hecho puré o licuado, 10g de agar-agar, 15g de azúcar, 900ml de agua destilada y 1,2g Tiamina. La Tiamina la podemos sustituir por cuatro comprimidos de algún remedio compuesto de Tiamina ( vitamina B1) de 300mg. Puede ser también utilizado un complejo polivitamínico ( Teregram M o Supradyn). 4.- Material vegetal: El material vegetal de partida puede ser del campo, pero esto conlleva un alto riesgo de enfermedades y contaminación, aunque se lave mucho y bien. Lo más corriente es utilizar brotes que crecen en condiciones controlada para que halla menos infecciones. Nosotros utilizaremos EXPLANTES ( pequeños trozos de tallos, yemas, hojas...) en un medio estéril y aséptico. Para esterilizar el material vegetal los explantes de 3-5mm se mezclan con 5ml de lejía comercial por litro de agua. Los agitamos durante 20 minutos. Después se aclaran tres veces con agua destilada previamente esterilizada. 5.- Cámara de Cultivo:La cámara de cultivo es una habitación de dimensiones muy variables, en la que se controlan las condiciones de luz, temperatura, humedad, variación día-noche, etc.. Nosotros utilizaremos unas cajas invernadero con luz artificial que hay en el laboratorio. ! VAMOS A INTENTARLO!